fiosrúchán

Is féidir an fungas pléasctha ríse Kosakonia oryziphila NP19 a úsáid mar spreagthóir fáis plandaí agus lotnaidicíd bhitheolaíoch chun pléascadh ríse den chineál KDML105 a chosc.

Léiríonn an staidéar seo gur bithlotnaidicíd agus bithlotnaidicíd geallmhar fáis plandaí é an fungas siombóiseach risosféir *Kosakonia oryziphila* NP19 atá scartha ó fhréamhacha ríse chun pléascadh ríse de bharr *Pyricularia oryzae* a rialú. Rinneadh turgnaimh in vitro ar dhuilleoga úra síológa ríse jasmine den chineál Khao Dawk Mali 105 (KDML105). Léirigh na torthaí gur chuir NP19 cosc ​​​​éifeachtach ar phéacadh conidia *Pyricularia oryzae*. Cuireadh cosc ​​​​ar ionfhabhtú *Pyricularia oryzae* faoi thrí choinníoll cóireála éagsúla: ar dtús, coilíníodh an rís le NP19 agus ionaclaíodh le conidia *Pyricularia oryzae*; sa dara háit, cuireadh meascán de NP19 agus conidia *Pyricularia oryzae* i bhfeidhm ar na duilleoga;
An baictéar risosféir *Kosakonia oryziphila* NP1914a leithlisiú ó fhréamhacha ríse (*Oryza sativa* L. cv. RD6). Tá airíonna fáis plandaí ag *Kosakonia oryziphila* NP19, lena n-áirítear socrú nítrigine, táirgeadh aigéad indolaicéiteach (IAA), agus intuaslagthacht fosfáite. Is díol spéise é go dtáirgeann *Kosakonia oryziphila* NP19 chitináis14.Feabhsaíodh marthanacht ríse tar éis ionfhabhtaithe le pléascadh ríse trí *Kosakonia oryziphila* NP19 a chur i bhfeidhm ar shíolta ríse KDML105. Is é aidhm an staidéir seo (i) meicníocht chosctha *Kosakonia oryziphila* NP19 i gcoinne pléascadh ríse a shoiléiriú agus (ii) imscrúdú a dhéanamh ar éifeacht *Kosakonia oryziphila* NP19 maidir le pléascadh ríse a rialú.

t01d0027d95519bc7b3
Tá ról ríthábhachtach ag cothaithigh i bhfás agus i bhforbairt plandaí, agus feidhmíonn siad mar fhachtóirí a rialaíonn galair mhiocróbacha éagsúla. Cinneann cothú mianraí planda a fhriotaíocht i gcoinne galair, tréithe moirfeolaíocha nó fíocháin, agus virúlacht, nó an cumas maireachtáil i gcoinne pataiginí. Is féidir le fosfar forbairt phléasc ríse a mhoilliú agus déine a laghdú trí shintéis comhdhúile feanólacha a mhéadú. Go ginearálta, laghdaíonn potaisiam minicíocht go leor galar ríse, amhail pléasc ríse, spota duille baictéarach, spota duille, lobhadh gais, agus spota duille. Léirigh staidéar le Perrenoud gur féidir le leasacháin ard-photaisiam minicíocht galair fungais ríse a laghdú freisin agus toradh a mhéadú. Léirigh staidéir iomadúla gur féidir le leasacháin sulfair friotaíocht barra i gcoinne pataiginí fungais a fheabhsú.27Is féidir le barraíocht maignéisiam (comhpháirt de chlóraifill) pléascadh ríse a bheith mar thoradh air.21Is féidir le since pataiginí a mharú go díreach, rud a laghdaíonn déine an ghalair.22Léirigh trialacha allamuigh, cé go raibh tiúchan fosfair, potaisiam, sulfair agus since san ithir allamuigh níos airde ná mar a bhí sa turgnamh pota, gur scaip an pléascadh ríse trí dhuilleoga ríse fós. B’fhéidir nach mbeadh cothaithigh ithreach an-éifeachtach maidir le pléascadh ríse a rialú, toisc nach bhfuil an taiseachas coibhneasta agus an teocht oiriúnach d’ionfhabhtú láidir pataiginí.
I dtrialacha allamuigh, braitheadh ​​Stenotrophomonas maltophilia, P. dispersa, Xanthomonas sacchari, Burkholderia multivorans, Burkholderia diffusa, Burkholderia vietnamiensis agus C. gleum i ngach cóireáil. Tá Stenotrophomonas maltophilia leithlisithe ó riosféar cruithneachta, coirce, cúcamair, arbhair agus prátaí agus tá sé léirithe go bhfuil sé bithrialaithe.gníomhaíochti gcoinne Colletotrichum nymphaeae.28 Ina theannta sin, tuairiscíodh go bhfuil P. dispersa éifeachtach i gcoinne lus an duine dhubhlobhadhpráta milis.29 Ina theannta sin, tá gníomhaíocht antagonach léirithe ag an strain R1 de Xanthomonas sacchari i gcoinne pléascadh ríse agus lobhadh panicle de bharr Burkholderiaglumae.30Is féidir le Burkholderia oryzae NP19 caidreamh siombóiseach a bhunú le fíochán ríse le linn péacadh agus fungas siombóiseach eindéimeach a bheith ann do roinnt cineálacha ríse. Cé gur féidir le baictéir ithreach eile rís a choilíniú tar éis trasphlandú, bíonn tionchar ag an fungas pléasctha NP19, nuair a bhíonn sé coilíniúite, ar ilfhachtóirí i meicníocht chosanta ríse i gcoinne an ghalair seo. Ní hamháin go gcuireann NP19 cosc ​​ar fhás P. oryzae níos mó ná 50% (féach Tábla Forlíontach S1 san aguisín ar líne), ach laghdaíonn sé líon na ngortuithe pléasctha ar dhuilleoga agus méadaíonn sé toradh na ríse atá ionaclaithe nó coilínithe le NP19 (RBf, RFf-B, agus RBFf-B) i dtrialacha allamuigh (Fíor S3).
Is fungas leathtrófach é an fungas Pyricularia oryzae, a chruthaíonn pléascadh plandaí, a éilíonn cothaithigh ón bplanda óstach le linn ionfhabhtaithe. Táirgeann plandaí speicis ocsaigine imoibríocha (ROS) chun ionfhabhtú fungasach a chosc; áfach, úsáideann Pyricularia oryzae réimse straitéisí chun dul i ngleic le ROS a tháirgeann an t-óstach.31Is cosúil go bhfuil ról ag peirocsaídáisí i bhfriotaíocht pataiginí, lena n-áirítear trasnascadh próitéiní balla cealla, tiúsú ballaí xiléime, táirgeadh ROS, agus neodrú sárocsaíd hidrigine.32D’fhéadfadh einsímí frithocsaídeacha feidhmiú mar chóras scabhtála ROS ar leith. Trína n-airíonna frithocsaídeacha, cuidíonn sárocsaíd dismutase (SOD) agus peroxidase (POD) le freagairtí cosanta a thionscnamh, agus SOD ag feidhmiú mar an chéad líne chosanta.33I rís, spreagtar gníomhaíocht peirocsaídáise plandaí tar éis ionfhabhtú le pataiginí plandaí amhail *Pyricularia oryzae* agus *Xanthomonas oryzae pv. Oryzae*.32Sa staidéar seo, mhéadaigh gníomhaíocht peirocsaídáise i rís a raibh *Magnaporthe oryzae* NP19 coilínithe agus/nó ionacraithe ann; áfach, ní raibh tionchar ag *Magnaporthe oryzae* ar ghníomhaíocht peirocsaídáise. Catalaíonn sárocsaíd dismutase (SOD), mar shintéis H₂O₂, laghdú O₂⁻ go H₂O₂. Tá ról ríthábhachtach ag SOD i bhfriotaíocht plandaí i gcoinne strusanna éagsúla trí thiúchan H₂O₂ a chothromú taobh istigh den phlanda, rud a fheabhsaíonn caoinfhulaingt plandaí i gcoinne strusanna éagsúla³⁴. Sa staidéar seo, sa turgnamh pota, 30 lá tar éis ionaclú *Magnaporthe oryzae* (30 DAT), bhí gníomhaíochtaí SOD sna grúpaí RF agus RBF 121.9% agus 104.5% níos airde ná iad siúd sa ghrúpa R, faoi seach, rud a léiríonn freagairt SOD ar ionfhabhtú *Magnaporthe oryzae*. Sna turgnaimh phota agus allamuigh araon, bhí gníomhaíochtaí SOD i rís inar ionacladh NP19 *Magnaporthe oryzae* 67.7% agus 28.8% níos airde ná iad siúd sa rís neamhionaclaithe 30 lá tar éis ionaclaithe, faoi seach. Bíonn tionchar ag an timpeallacht, foinse struis, agus cineál plandaí³⁵ ar fhreagairtí bithcheimiceacha plandaí. Bíonn tionchar díreach ag tosca comhshaoil ​​ar ghníomhaíochtaí einsímí frithocsaídeacha plandaí, a mbíonn tionchar acu ar ghníomhaíochtaí einsímí frithocsaídeacha plandaí trí phobal miocróbach an phlanda a athrú.
Ba é an fungas galar pléasctha ríse (Kosakonia oryziphila NP19, uimhir iontrála NCBI PP861312) a úsáideadh sa staidéar seo an cineál13arna leithlisiú ó fhréamhacha an chultúir ríse RD6 i gCúige Nakhon Phanom, an Téalainn (16° 59′ 42.9″ T 104° 22′ 17.9″ O). Saothraíodh an cineál seo i mbrú cothaitheach (NB) ag 30°C agus 150 rpm ar feadh 18 uair an chloig. Chun an tiúchan baictéarach a ríomh, tomhaiseadh ionsú an fhionraí baictéaraigh ag 600 nm. Coigeartaíodh tiúchan an fhionraí baictéaraigh go10⁶CFU/mL le huisce dí-ianaithe steiriúil (dH₂ORinneadh ionaclú spota ar an bhfungas pléasctha ríse (Pyricularia oryzae) ar agar deasglúcós prátaí (PDA) agus goradh é ag 25°C ar feadh 7 lá. Aistríodh an mícéiliam fungasach go meán agar bran ríse (2% (m/v) bran ríse, 0.5% (m/v) siúcrós, agus 2% (m/v) agar tuaslagtha in uisce dí-ianaithe, pH 7) agus goradh é ag 25°C ar feadh 7 lá. Cuireadh duilleog steirilithe de chultivar ríse so-ghabhálach (KDML105) ar an mícéiliam chun conidia a spreagadh agus goradh é ag 25°C ar feadh 5 lá faoi sholas UV agus bán le chéile. Bailíodh conidia tríd an mícéiliam agus dromchla na duilleoige ionfhabhtaithe a ghlanadh go réidh le 10 ml de thuaslagán steirilithe Tween 20 0.025% (v/v). Scagadh an tuaslagán fungasach trí ocht sraithe d'éadach cáise chun an mícéiliam, an t-agar, agus duilleoga ríse a bhaint. Coigeartaíodh tiúchan na gconaidí sa fhionraí go 5 × 10⁵ conaidí/ml le haghaidh tuilleadh anailíse.
Ullmhaíodh cultúir úra de chealla Kosakonia oryziphila NP19 trína saothrú i meán NB ag 37 °C ar feadh 24 uair an chloig. Tar éis lártheifneoirithe (3047 × g, 10 nóiméad), bailíodh an millín cille, nite faoi dhó é le saline maolaithe fosfáite 10 mM (PBS, pH 7.2), agus athfhionraíodh é sa mhaolán céanna. Tomhaiseadh dlús optúil an fhionraí cille ag 600 nm, ag fáil luach de thart ar 1.0 (comhionann le 1.0 × 10⁷ CFU/μl arna chinneadh trí phlátáil ar phlátaí agair cothaitheach). Fuarthas conidia de P. oryzae trína bhfionraí i dtuaslagán PBS agus iad a chomhaireamh ag baint úsáide as hemocytometer. Fionraí de *K. oryziphila* NP19 agus *P. I gcás na dturgnaimh smearaidh duilleog, ullmhaíodh conidia K. oryziphila* ar dhuilleoga ríse úra ag tiúchain 1.0 × 10⁷ CFU/μL agus 5.0 × 10² conidia/μL, faoi seach. Seo a leanas an modh ullmhúcháin sampla ríse: gearradh duilleoga 5 cm ar fhad ó shíológa ríse agus cuireadh i miasa Petri iad atá líneáilte le páipéar ionsúiteach tais. Bunaíodh cúig ghrúpa cóireála: (i) R: duilleoga ríse gan ionaclú baictéarach mar rialú, agus tuaslagán 0.025% (v/v) Tween 20 mar fhorlíonadh orthu; (ii) RB + F: rís ionaclúite le K. oryziphila NP19, agus 2 μL de fhionraí conidia an fhungais is cúis le pléascadh ríse mar fhorlíonadh uirthi; (iii) R + BF: Rís i ngrúpa R ar cuireadh 4 μl de mheascán de fhionraí conidia fungais phléasctha agus K. oryziphila NP19 (cóimheas toirte 1:1) leis an rís; (iv) R + F: Rís i ngrúpa R a raibh 2 μl de fhionraí conidia fungais phléasctha curtha leis; (v) RF + B: Goradh rís i ngrúpa R a raibh 2 μl de fhionraí conidia fungais phléasctha curtha leis ar feadh 30 uair an chloig, agus ansin cuireadh 2 μl de K. oryziphila NP19 leis san áit chéanna. Goradh na miasa Petri go léir ag 25°C sa dorchadas ar feadh 30 uair an chloig agus ansin cuireadh faoi sholas leanúnach iad. Cruthaíodh gach grúpa faoi thrí. Tar éis 72 uair an chloig de chultúr, breathnaíodh agus anailísíodh na fíocháin plandaí trí mhicreascópacht leictreon scanála (SEM). Go hachomair, socraíodh fíocháin plandaí i maolán fosfáite ina raibh 2.5% (v/v) glutaraldehyde agus díhiodráitíodh iad trí shraith tuaslagán eatánóil. Tar éis triomú pointe criticiúil le dé-ocsaíd charbóin, rinneadh na samplaí a sciathú le hór le spútar agus scrúdaíodh iad ar deireadh ag baint úsáide as micreascóp leictreon scanála.15

 


Am poist: 15 Nollaig 2025