fiosrúchán

Gníomhaíonn fosfaraileadh an príomhrialtóir fáis DELLA, rud a chuireann ceangal históin H2A le crómatin in Arabidopsis chun cinn.

Tá próitéiní DELLA caomhnaitherialtóirí fáisa bhfuil ról lárnach acu i bhforbairt plandaí mar fhreagairt ar chomharthaí inmheánacha agus seachtracha. Mar rialtóirí trascríobhacha, ceanglaíonn DELLAí le fachtóirí trascríobhacha (TFanna) agus le histón H2A trína bhfearann ​​​​GRAS agus earcaítear iad chun gníomhú ar thionscnóirí. Léirigh staidéir le déanaí go rialaítear cobhsaíocht DELLA iar-aistriúcháin le dhá mheicníocht: polai-ubiquitination spreagtha ag an hormón plandaígibberellin, rud a fhágann go ndíghrádaítear go tapa iad, agus go ndéantar iad a chomhchuingiú le modhnóir beag cosúil le huibicitín (SUMO), rud a mhéadaíonn a gcarnadh. Thairis sin, rialaítear gníomhaíocht DELLA go dinimiciúil ag dhá mheicníocht gliceála ar leith: feabhsaíonn O-fúcosailíocht idirghníomhaíocht DELLA-TF, ach cuireann modhnú N-aicéitilglúcóisimín (O-GlcNAc) atá nasctha le O cosc ​​ar idirghníomhaíocht DELLA-TF. Mar sin féin, níl ról fhosfarailíocht DELLA soiléir mar a léirigh staidéir roimhe seo torthaí contrártha, agus tugann cuid acu le fios go gcuireann fosfarailíocht chun cinn nó go gcuireann sí cosc ​​ar dhíghrádú DELLA agus tugann daoine eile le fios nach mbíonn tionchar ag fosfarailíocht ar a gcobhsaíocht. Anseo, sainaithnímid suíomhanna fosfarailíochta sa choscóir GA1-3 (RGA), AtDELLA, íonaithe ó Arabidopsis thaliana trí mhais-speictriméadracht agus taispeánaimid go bhfeabhsaíonn fosfarailíocht dhá pheiptíd RGA sna réigiúin PolyS agus PolyS/T gníomhaíocht RGA trí cheangal H2A agus comhlachas RGA le tionscnóirí sprice a chur chun cinn. Is suntasach nár chuir fosfarailíocht isteach ar idirghníomhaíochtaí RGA-TF ná ar chobhsaíocht RGA. Nochtann ár staidéar meicníocht mhóilíneach trína spreagann fosfaraileadh gníomhaíocht DELLA.
Léirigh ár n-anailís mais-speictriméadrach go raibh fosfaraileadh ard ar Pep1 agus Pep2 araon in RGA sa chúlra Ga1 easnamhach i GA. Chomh maith leis an staidéar seo, léirigh staidéir fosfaipróiteomacha fosfaraileadh Pep1 in RGA freisin, cé nach bhfuil a ról staidéaraithe fós53,54,55. I gcodarsnacht leis sin, níor tuairiscíodh fosfaraileadh Pep2 roimhe seo ós rud é nach bhféadfaí an peiptíd seo a bhrath ach amháin ag baint úsáide as an trasghéin RGAGKG. Cé nár laghdaigh an sóchán m1A, a chuir deireadh le fosfaraileadh Pep1, gníomhaíocht RGA ach beagán i planta, bhí éifeacht bhreise aige nuair a cuireadh le chéile é le m2A maidir le gníomhaíocht RGA a laghdú (Fíor Forlíontach 6). Rud tábhachtach, laghdaíodh fosfaraileadh Pep1 go suntasach sa sóchán sly1 feabhsaithe le GA i gcomparáid le ga1, rud a thugann le fios go gcuireann GA dífhosfaraileadh RGA chun cinn, ag laghdú a ghníomhaíochta. Éilíonn an mheicníocht trína gcuireann GA cosc ​​ar fhosfaraileadh RGA imscrúdú breise. Is féidir go mbaintear é seo amach trí rialáil próitéine cínáis anaithnid. Cé gur léirigh staidéir go laghdaítear léiriú an chináis phróitéine CK1 EL1 ag GA i rís41, léiríonn ár dtorthaí nach laghdaíonn sócháin ard-ord den homalóg Arabidopsis EL1 (AEL1-4) fosfaraileadh RGA. I gcomhréir lenár dtorthaí, níor aithin staidéar fosfapróitéamaíoch le déanaí a d'úsáid línte ró-léirithe Arabidopsis AEL agus trí-mhútán ael aon phróitéiní DELLA mar foshraitheanna de na cínáisí seo56. Nuair a d'ullmhaíomar an lámhscríbhinn, tuairiscíodh gur féidir le GSK3, an ghéin a ionchódaíonn cínáis cosúil le GSK3/SHAGGY i gcruithneacht (Triticum aestivum), DELLA (Rht-B1b)57 a fhosfaraileadh, cé nach bhfuil fosfaraileadh Rht-B1b ag GSK3 deimhnithe in planta. Léirigh imoibrithe einsímeacha in vitro i láthair GSK3 agus anailís mais-speictriméadrachta ina dhiaidh sin trí shuíomh fosfaraileadh suite idir fearainn DELLA agus GRAS de Rht-B1b (Fíor Fhorlíontach 3). Mar thoradh ar ionadú seirín go alanín ag na trí shuíomh fosfarailithe, laghdaíodh gníomhaíocht Rht-B1b i gcruithneacht thrasghéineach, rud atá comhsheasmhach lenár dtorthaí gur laghdaigh ionadú alanín i Pep2 RGA gníomhaíocht RGA. Mar sin féin, léirigh anailísí díghrádaithe próitéine in vitro gur féidir le fosfaraileadh Rht-B1b57 a chobhsú freisin. Tá sé seo i gcodarsnacht lenár dtorthaí a léiríonn nach n-athraíonn ionadú alanín i Pep2 RGA a chobhsaíocht i planta. Is ortalog de phróitéin 2 neamhíogair brassinosteroid (BIN2) in Arabidopsis 57 é GSK3 i gcruithneacht. Is rialtóir diúltach comharthaíochta BR é BIN2, agus gníomhaíonn BR a chonair comharthaíochta trí dhíghrádú BIN2 58 a chur faoi deara. Thaispeánamar nach laghdaíonn cóireáil BR cobhsaíocht RGA 59 ná leibhéil fosfarailithe in Arabidopsis (Fíor Forlíontach 2), rud a thugann le fios nach dócha go ndéanfar RGA a fhosfaraileadh ag BIN2.
Rinneadh anailís staitistiúil ar na sonraí cainníochtúla go léir ag baint úsáide as Excel, agus cinneadh difríochtaí suntasacha ag baint úsáide as tástáil-t an Mhic Léinn. Níor úsáideadh aon mhodhanna staitistiúla chun méid an tsampla a réamhchinneadh. Níor eisiadh aon sonraí ón anailís; ní raibh an turgnamh randamach; agus bhí na taighdeoirí ar an eolas faoin leithdháileadh le linn an turgnaimh agus an mheasúnaithe ar thorthaí. Soláthraítear méideanna na samplaí sna finscéalta figiúirí agus sna comhaid sonraí amha.

 

Am an phoist: 15 Aibreán 2025