Gníomhaíonn fosfarylation an máistir-rialtóir fáis DELLA in Arabidopsis trí chomhlachas histone H2A le crómatin a chur chun cinn.

Tá próitéiní DELLA caomhnaithe máistirrialtóirí fáisa bhfuil ról lárnach acu maidir le forbairt plandaí a rialú mar fhreagra ar leideanna inmheánacha agus comhshaoil. Feidhmíonn DELLA mar rialtóir trascríobh agus earcaítear é chun díriú ar thionscnóirí trí cheangal a dhéanamh ar fhachtóirí trascríobh (TFanna) agus histone H2A trína bhfearann ​​​​GRAS. Tá sé léirithe ag staidéir le déanaí go ndéantar cobhsaíocht DELLA a rialáil go hiar-aistrithe trí dhá mheicníocht: polyubiquitination arna spreagadh ag an fíteas-hormone gibberellin, as a dtagann a dhíghrádú tapa, agus comhchuingeach modhnóirí beaga cosúil le hubiquitin (SUMO) chun a charnadh a mhéadú. Ina theannta sin, déantar gníomhaíocht DELLA a rialáil go dinimiciúil ag dhá ghlocóisiliúchán éagsúla: cuirtear feabhas ar an idirghníomhaíocht DELLA-TF le O-fucosylation ach tá bac ar mhodhnú O-nasctha N-acetylglucosamine (O-GlcNAc). Mar sin féin, níl an ról atá ag fosfarylation DELLA soiléir, mar léirigh staidéir roimhe seo torthaí contrártha, ó na cinn a thaispeánann go gcuireann fosfarylation chun cinn nó go laghdaíonn sé díghrádú DELLA go cinn eile a léiríonn nach gcuireann fosfarylation isteach ar a chobhsaíocht. Anseo, sainaithnímid suíomhanna fosfarylation i REPRESSORga1-3(RGA, AtDELLA) íonaithe ó Arabidopsis thaliana trí anailís mais-speictriméadrachta agus léiríonn sé go gcuireann fosfarylation de dhá pheptídí RGA ag na réigiúin PolyS agus PolyS/T gníomhaíocht H2A ceangailteach agus feabhsaithe RGA chun cinn. Comhlachas RGA le tionscnóirí sprice. Go háirithe, ní chuireann fosfarylation isteach ar idirghníomhaíochtaí RGA-TF ná ar chobhsaíocht RGA. Nochtann ár staidéar an mheicníocht mhóilíneach trína spreagann fosfarylation gníomhaíocht DELLA.
Chun an ról atá ag fosfarylation i rialú feidhm DELLA a shoiléiriú, tá sé ríthábhachtach suíomhanna fosfarlaithe DELLA in vivo a aithint agus anailísí feidhmiúla a dhéanamh ar phlandaí. Trí íonú cleamhnais a dhéanamh ar shleachta plandaí agus anailís MS/MS ina dhiaidh sin, d’aithníomar roinnt fosfáití in RGA. Faoi choinníollacha easnamh GA, méaduithe RHA phosphorylation, ach ní phosphorylation difear a cobhsaíocht. Rud atá tábhachtach, léirigh measúnachtaí comh-IP agus ChIP-qPCR go gcuireann fosfarylation ag an réigiún PolyS/T de RGA chun cinn a idirghníomhú le H2A agus a chomhcheangal le tionscnóirí sprice, ag nochtadh an mheicníocht trína n-ardaíonn fosfarylation feidhm RGA.
Earcaítear RGA chun díriú ar chromatin trí idirghníomhú an fhofhearainn LHR1 le TF agus ansin ceanglaíonn sé le H2A trína réigiún PolyS/T agus fofhearann ​​PFYRE, ag cruthú coimpléasc H2A-RGA-TF chun RGA a chobhsú. Cuireann fosfarú Pep 2 sa réigiún PolyS/T idir fearann ​​DELLA agus fearann ​​GRAS ag kinase neamhaitheanta le ceangal RGA-H2A. Cuireann an próitéin mutant rgam2A deireadh le fosphorylation RGA agus glacann sé cruth difriúil próitéine chun cur isteach ar cheangal H2A. Mar thoradh air seo déantar idirghníomhaíochtaí neamhbhuan TF-rgam2A a dhíchobhsú agus díthiomsú rgam2A ón spriocchrómatin. Ní thaispeánann an figiúr seo ach faoi chois tras-idirghabhálaithe RGA-idirghabhála. D’fhéadfaí cur síos a dhéanamh ar phatrún comhchosúil maidir le gníomhachtú tras-idirghabhála RGA-idirghabhála, ach amháin go gcuirfeadh an coimpléasc H2A-RGA-TF tras-ghéine sprice chun cinn agus go laghdódh dífhosfarú rgam2A trascríobh. Athraíodh an figiúr ó Huang et al.21.
Rinneadh anailís staitistiúil ar na sonraí cainníochtúla go léir ag baint úsáide as Excel, agus aimsíodh difríochtaí suntasacha ag baint úsáide as tástáil t Student. Níor úsáideadh aon mhodhanna staidrimh chun méid an tsampla a chinneadh roimh ré. Níor fágadh aon sonraí as an áireamh san anailís; níor rinneadh an turgnamh go randamach; ní raibh na taighdeoirí dall ar dháileadh na sonraí le linn an turgnaimh agus meastóireachta na dtorthaí. Léirítear méid an tsampla sa bhunscéal agus sa bhunchomhad sonraí.
Chun tuilleadh eolais a fháil faoi dhearadh an staidéir, féach an Coimriú ar Thuarascáil na Punainne Nádúrtha a bhaineann leis an Airteagal seo.
Tá sonraí próitéamaíocha mais-speictriméadrachta curtha leis an gcuibhreannas ProteomeXchange tríd an stór comhpháirtíochta PRIDE66 le haitheantóir tacar sonraí PXD046004. Cuirtear na sonraí eile go léir a fuarthas le linn an staidéir seo i láthair san Fhaisnéis Fhorlíontach, sna Comhaid Sonraí Forlíontacha, agus sna Comhaid Sonraí Amh. Soláthraítear sonraí foinse don alt seo.