Is máistir-chaomhnaithe próitéiní DELLArialtóirí fáisa bhfuil ról lárnach acu i bhforbairt plandaí a rialú mar fhreagairt ar chomharthaí inmheánacha agus comhshaoil. Feidhmíonn DELLA mar rialtóir trascríobh agus earcaítear é chun díriú ar thionscnóirí trí cheangal le fachtóirí trascríobh (TFanna) agus histón H2A trína fhearann GRAS. Léirigh staidéir le déanaí go rialaítear cobhsaíocht DELLA iar-aistriúcháin trí dhá mheicníocht: polai-ubiciútiniú spreagtha ag an bhfíteahormón gibberellin, rud a fhágann a dhíghrádú tapa, agus comhchuingiú modhnóirí beaga cosúil le huiciútin (SUMO) chun a charnadh a mhéadú. Ina theannta sin, rialaítear gníomhaíocht DELLA go dinimiciúil ag dhá ghlúcósúlú éagsúla: feabhsaítear an t-idirghníomhaíocht DELLA-TF trí O-fhúcósúlú ach cuirtear cosc air trí mhodhnú N-aicéitilglúcósamín (O-GlcNAc) atá nasctha le O. Mar sin féin, níl ról fosfarú DELLA soiléir fós, toisc gur léirigh staidéir roimhe seo torthaí contrártha, idir na cinn a léiríonn go gcuireann fosfarú chun cinn nó go laghdaíonn sé díghrádú DELLA agus cinn eile a léiríonn nach ndéanann fosfarú difear dá chobhsaíocht. Anseo, sainaithnímid suíomhanna fosfarúlú i REPRESSOR.ga1-3(RGA, AtDELLA) íonaithe ó Arabidopsis thaliana trí anailís mais-speictriméadrachta agus léiríonn siad go gcuireann fosfaraileadh dhá pheiptíd RGA ag na réigiúin PolyS agus PolyS/T ceangal H2A chun cinn agus go bhfeabhsaíonn sé gníomhaíocht RGA. Comhlachas RGA le tionscnóirí sprice. Is suntasach nach mbíonn tionchar ag fosfaraileadh ar idirghníomhaíochtaí RGA-TF ná ar chobhsaíocht RGA. Nochtann ár staidéar an mheicníocht mhóilíneach trína spreagann fosfaraileadh gníomhaíocht DELLA.
Chun ról an fhosfarailithe i rialáil fheidhm DELLA a shoiléiriú, tá sé ríthábhachtach suíomhanna fosfarailithe DELLA a aithint in vivo agus anailísí feidhmiúla a dhéanamh i bplandaí. Trí íonú claonta sleachta plandaí agus ansin anailís MS/MS, shainaithin muid roinnt fosfaítí in RGA. Faoi choinníollacha easnaimh GA, méadaíonn fosfaraileadh RHA, ach ní dhéanann an fosfaraileadh difear dá chobhsaíocht. Rud tábhachtach, léirigh aistí comh-IP agus ChIP-qPCR go gcuireann fosfaraileadh ag réigiún PolyS/T RGA a idirghníomhaíocht le H2A agus a chomhlachas le tionscnóirí sprice chun cinn, rud a nochtann an mheicníocht trína spreagann fosfaraileadh feidhm RGA.
Earcaítear RGA chun crómatin spriocdhírithe a spriocdhíriú trí idirghníomhú fho-fhearann LHR1 le TF agus ansin ceanglaíonn sé le H2A trína réigiún PolyS/T agus fo-fhearann PFYRE, ag foirmiú an choimpléasc H2A-RGA-TF chun RGA a chobhsú. Feabhsaíonn fosfaraileadh Pep 2 sa réigiún PolyS/T idir fearann DELLA agus fearann GRAS ag cíneas neamhaitheanta ceangal RGA-H2A. Cuireann an próitéin mhútach rgam2A deireadh le fosfaraileadh RGA agus glacann sé comhréireacht próitéine difriúil chun cur isteach ar cheangal H2A. Mar thoradh air seo, déantar idirghníomhaíochtaí TF-rgam2A neamhbhuana a dhíchobhsú agus dícheangal rgam2A ón gcrómatin spriocdhírithe. Ní léiríonn an figiúr seo ach cosc trascríobhach idirghabhálaithe ag RGA. D'fhéadfaí patrún cosúil a chur síos le haghaidh gníomhachtú trascríobhach idirghabhálaithe ag RGA, ach amháin go gcuirfeadh an coimpléasc H2A-RGA-TF trascríobh géine spriocdhírithe chun cinn agus go laghdódh dífhosfaraileadh rgam2A trascríobh. Fíor modhnaithe ó Huang et al.21.
Rinneadh anailís staitistiúil ar na sonraí cainníochtúla go léir ag baint úsáide as Excel, agus cinneadh difríochtaí suntasacha ag baint úsáide as tástáil t an Mhic Léinn. Níor úsáideadh aon mhodhanna staitistiúla chun méid an tsampla a chinneadh go réamhchéimneach. Níor eisiadh aon sonraí ón anailís; ní raibh an turgnamh randamach; ní raibh na taighdeoirí dall ar dháileadh na sonraí le linn an turgnaimh agus ar mheasúnú na dtorthaí. Léirítear méid an tsampla i finscéal an fhigiúir agus sa chomhad sonraí foinse.
Le haghaidh tuilleadh eolais faoi dhearadh an staidéir, féach ar Achoimre ar Thuarascáil na Punainne Nádúrtha a bhaineann leis an alt seo.
Cuireadh sonraí próitéimeice mais-speictriméadrachta ar fáil do chomhghuaillíocht ProteomeXchange tríd an stór comhpháirtíochta PRIDE66 leis an aitheantóir tacair sonraí PXD046004. Cuirtear na sonraí eile go léir a fuarthas le linn an staidéir seo i láthair san Fhaisnéis Fhorlíontach, sna Comhaid Sonraí Forlíontacha, agus sna Comhaid Sonraí Amha. Cuirtear sonraí foinse ar fáil don alt seo.
Am an phoist: 08 Samhain 2024