Ábhair phlandaí agus pataigin
Chuir an Dr. Pat Brown in Ollscoil Illinois (anois ag UC Davis) daonra léarscáilithe comhlachais sorghum ar fáil ar a dtugtar an daonra tiontaithe sorghum (SCP).Tá cur síos déanta air roimhe seo agus is bailiúchán de línte ilghnéitheacha é a tiontaíodh go dtí neamhíogaireacht photoperiod agus stádas níos lú chun fás agus forbairt na bplandaí i dtimpeallachtaí SAM a éascú.Baineadh úsáid as 510 líne ón daonra seo sa staidéar seo cé gur de bharr droch-phéacadh agus saincheisteanna rialaithe cáilíochta eile, níor úsáideadh na línte ar fad san anailís ar na trí thréith.I ndeireadh na dála baineadh úsáid as sonraí ó 345 líne chun anailís a dhéanamh ar an bhfreagra chitin, 472 líne don fhreagra flg22, agus 456 le haghaidh friotaíochta TLS.B. cookeiFuarthas brú LSLP18 ón Dr. Burt Bluhm in Ollscoil Arkansas.
Tomhas freagartha MAMP
Baineadh úsáid as dhá CMAnna éagsúla sa staidéar seo flg22, (catalóg Genscript # RP19986), agus chitin .Fásadh plandaí Sorghum i ionsáigh a leagadh ar árasáin a líonadh le hithreach (33% Sunshine Redi-Earth Pro Growing Mix) sa cheaptha teasa.Cuireadh uisce ar phlandaí an lá roimh bhailiú na samplaí chun taise breise duille a sheachaint ar lá an bhailiúcháin.
Rinneadh na línte a randamach agus, ar chúiseanna lóistíochta, cuireadh iad i mbaisceanna de 60 líne.I gcás gach líne, cuireadh trí 'phota' le dhá shíolta in aghaidh an líne.Cuireadh baisceanna ina dhiaidh sin chomh luath agus a bhí an bhaisc roimhe sin próiseáilte go dtí go raibh an daonra iomlán measúnaithe.Rinneadh dhá rith thurgnamhacha don dá MAMP agus rinneadh géinitíopaí a ath-randomú i ngach ceann den dá rith.
Rinneadh measúnachtaí ROS mar a thuairiscítear roimhe seo.Go hachomair, do gach líne, cuireadh sé shíolta i 3 phota éagsúla.Ó na síológa mar thoradh air sin, roghnaíodh trí cinn bunaithe ar aonfhoirmeacht.Níor úsáideadh síológa a bhí cuma neamhghnách nó a bhí i bhfad níos airde nó níos giorra ná an chuid is mó.Gearradh ceithre dhiosca duille de thrastomhas 3 mm ón gcuid is leithne den 4ú duilleog de thrí ghléasra sorghim 15 lá d'aois.Diosca amháin do gach duilleog ó dhá phlanda agus dhá dhiosca ó phlanda amháin, agus an dara diosca ina rialú uisce (féach thíos).Snámhaíodh na dioscaí ina n-aonar ar 50 µl H20 i pláta dubh 96-tobar, séalaithe le séala alúmanaim chun nochtadh don solas a sheachaint, agus coinníodh iad ag teocht an tseomra thar oíche.An mhaidin dár gcionn rinneadh tuaslagán imoibrithe ag baint úsáide as 2 mg/ml chemiluminescent probe L-012 (Wako, catalóg # 120-04891), 2 mg/ml horseradish peroxidase (Cineál VI-A, Sigma-Aldrich, catalóg # P6782), agus 100 mg/ml Chitin nó 2 μM de Flg22.Cuireadh 50 µl den tuaslagán imoibrithe seo le trí cinn de na ceithre thobar.Bréigerialtán a bhí sa cheathrú tobar, agus cuireadh an tuaslagán imoibrithe gan an MAMP san áireamh leis.Cuireadh ceithre thobar bhána nach raibh iontu ach uisce san áireamh i ngach pláta freisin.
Tar éis an tuaslagán imoibrithe a chur leis, rinneadh an luminescence a thomhas ag baint úsáide as léitheoir microplate ilbhraite SynergyTM 2 (BioTek) gach 2 nóiméad ar feadh 1 hr.Déanann an léitheoir pláta tomhais luminescence gach 2 nóiméad le linn an 1 u.Ríomhadh suim na 31 léamh go léir chun luach gach tobair a thabhairt.Ríomhadh an luach measta don fhreagra MAMP do gach géinitíopa mar (meánluach luminescence na dtrí thobar thurgnamhach - an luach tobair bréige) - lúide an meánluach tobair bán.Bhí luachanna bána an tobair gar do nialas i gcónaí.
Dioscaí duille deNicotiana benthamiana, áiríodh líne sorghum ardfhreagrúil amháin (SC0003), agus líne sorghum ísealfhreagrúil amháin (PI 6069) freisin mar rialuithe i ngach pláta 96-tobar chun críocha rialaithe cáilíochta.
B. cookeiullmhú ionaculum agus ionaclaithe
B. cookeiullmhaíodh inoculum mar a thuairiscítear roimhe seo.Go hachomair, sáithíodh na gráinní sorgwm in uisce ar feadh trí lá, iad a rinsiú, a scoopáil isteach i bhfleascáin chónúla 1L agus iad a uathchlátáil ar feadh uaire ag 15psi agus 121 °C.Rinneadh na gráinní a ionaclú ansin le thart ar 5 ml de mhicelia maothaithe ó chultúr úr deB. cookeiDéanann LSLP18 aonrú agus fágtar é ar feadh 2 sheachtain ag teocht an tseomra, croithtear na fleascáin gach 3 lá.Tar éis 2 sheachtain, rinneadh na gráinní sorgwm inmhíolaithe den fhungas a aer-thriomú agus ansin stóráiltear iad ag 4 °C go dtí go ndearnadh ionaclú ar an bpáirc.Úsáideadh an t-ionaculum céanna don triail iomlán agus rinneadh é úr gach bliain.Le haghaidh ionaclaithe, cuireadh 6-10 grán inmhíolaithe isteach sa spréach de phlandaí sorgwm 4-5 seachtaine d'aois.Chuir na spóir a tháirgtear ó na fungais seo tús le hionfhabhtú sna plandaí sorghum óga laistigh de sheachtain.
Ullmhú síolta
Sula plandáil sa réimse, déileáladh le síol sorghum le meascán fungaicíd, feithidicíd, agus teorantóra ina raibh ~ 1% fungaicíd Spirato 480 FS, fungaicíd 4% Sebring 480 FS, teorantóir síolta 3% Sorpro 940 ES.Ansin rinneadh na síolta a aer-thriomú ar feadh 3 lá, rud a chuir sciath tanaí den mheascán seo timpeall na síolta.Cheadaigh an teorantóir an luibhicíd Dual Magnum a úsáid mar chóireáil réamhtheachtaithe.
Measúnú ar fhriotaíocht Spota na nDuilleoga Sprioc
Cuireadh an SCP ag an Stáisiún Lárnach um Thaighde Barra i Clayton, NC ar 14-15 Meitheamh 2017 agus 20 Meitheamh, 2018 i ndearadh bloc iomlán randamach le dhá mhacasamhlú thurgnamhach i ngach cás.Cuireadh turgnaimh i sraitheanna singil 1.8 m le leithead sraithe 0.9 m ag baint úsáide as 10 síolta in aghaidh an phlota.Cuireadh dhá shraith teorann timpeall imeall gach turgnaimh chun éifeachtaí imeallacha a chosc.Rinneadh na turgnaimh a ionaclú ar 20 Iúil, 2017 agus ar 20 Iúil, 2018 agus ag an bpointe sin bhí na plandaí sorghum ag céim fáis 3. Glacadh rátálacha ar scálaí 1-9 , áit ar scóráil plandaí nach raibh aon chomharthaí galair orthu mar naoi agus go hiomlán. scóráladh plandaí marbh mar aon ní amháin.Glacadh dhá rátáil in 2017 agus ceithre léamh in 2018 ag tosú dhá sheachtain tar éis ionaclaithe gach bliain.Ríomhadh sAUDPC (limistéar caighdeánaithe faoi chuar dul chun cinn an ghalair) mar a thuairiscítear roimhe seo.
Am postála: Apr-01-2021