Is eindoparasít imirceach coraintín é an néimeatóid péine ar a dtugtar caillteanais eacnamaíocha tromchúiseacha a chruthú in éiceachórais foraoise péine. Déanann an staidéar seo athbhreithniú ar ghníomhaíocht néimeaticídeach indóil halaiginithe i gcoinne néimeatóidí péine agus a meicníocht gníomhaíochta. Bhí gníomhaíochtaí néimeaticídeacha 5-iaidíndóil agus avermectin (rialú dearfach) i gcoinne néimeatóidí péine cosúil agus ard ag tiúchain ísle (10 μg/mL). Laghdaigh 5-iaidíndóil torthúlacht, gníomhaíocht atáirgthe, básmhaireacht suthach agus larbhach, agus iompar gluaiseachta. Tacaíonn idirghníomhaíochtaí móilíneacha ligand le gabhdóirí cainéal clóiríde atá sainiúil d'inveirteabraigh atá geataithe ag glútamat leis an tuairim go gceanglaíonn 5-iaidíndóil, cosúil le avermectin, go docht leis an suíomh gníomhach gabhdóra. Spreag 5-iaidíndóil dífhoirmíochtaí feinitíopacha éagsúla i néimeatóidí freisin, lena n-áirítear titim/crapadh neamhghnácha orgán agus méadú ar fholúisíocht. Tugann na torthaí seo le fios go bhféadfadh ról a bheith ag folúisí i mbás de bharr meitiliúcháin néimeatóide. Rud tábhachtach ná nach raibh 5-iaidíndól tocsaineach don dá speiceas plandaí (cabáiste agus raidis). Dá bhrí sin, léiríonn an staidéar seo gur féidir le cur i bhfeidhm iaidíndóil faoi dhálaí comhshaoil díobháil feoite péine a rialú.
Baineann néimeatóid adhmaid péine (Bursaphelenchus xylophilus) leis na néimeatóidí adhmaid péine (PWN), néimeatóidí eindiparasíteacha imirceacha ar a dtugtar go ndéanann siad damáiste éiceolaíoch tromchúiseach d'éiceachórais foraoise péine1. Tá galar feoite péine (PWD) de bharr an néimeatóid adhmaid péine ag éirí ina fhadhb thromchúiseach ar roinnt mór-roinne, lena n-áirítear an Áise agus an Eoraip, agus i Meiriceá Thuaidh, scriosann an néimeatóid speicis péine a tugadh isteach1,2. Is fadhb mhór eacnamaíoch í meath crann péine, agus tá imní ann go scaipfidh sé ar fud an domhain3. Is iad na speicis péine seo a leanas is minice a ionsaíonn an néimeatóid: Pinus densiflora, Pinus sylvestris, Pinus thunbergii, Pinus koraiensis, Pinus thunbergii, Pinus thunbergii, agus Pinus radiata4. Is galar tromchúiseach é an néimeatóid péine ar féidir leis crainn péine a mharú laistigh de sheachtainí nó míonna ón ionfhabhtú. Ina theannta sin, is coitianta ráigeanna néimeatóide péine i réimse éiceachóras, mar sin tá slabhraí ionfhabhtaithe leanúnacha bunaithe1.
Is néimeatóid phlandaí-seadánach coraintín é Bursaphelenchus xylophilus a bhaineann leis an sárfhine Aphelenchoidea agus clade 102.5. Beathaíonn an néimeatóid fungais agus atáirgeann sé i bhfíocháin adhmaid crainn ghiúise, ag forbairt i gceithre chéim larbhach éagsúla: L1, L2, L3, L4 agus duine fásta1,6. Faoi dhálaí ganntanas bia, téann an néimeatóid ghiúise isteach i gcéim larbhach speisialaithe - dauer, a dhéanann seadánú ar a veicteoir - an ciaróg coirt ghiúise (Monochamus alternatus) agus a aistrítear chuig crainn ghiúise sláintiúla é. In óstaigh shláintiúla, imirceann néimeatóidí go tapa trí fhíocháin plandaí agus beathaíonn siad ar chealla paireincímatacha, rud a fhágann roinnt imoibrithe hipiríogaireachta, meathlú ghiúise agus bás laistigh de bhliain tar éis ionfhabhtaithe1,7,8.
Is dúshlán fada an lá rialú bitheolaíoch néimeatóidí péine, agus bearta coraintín ag dul siar go dtí an 20ú haois. Baineann na straitéisí reatha chun néimeatóidí péine a rialú go príomha le cóireálacha ceimiceacha, lena n-áirítear fumigation adhmaid agus ionchlannú néimeatóidí i stoic crann. Is iad avermectin agus beinsoáit avermectin na néimeatóidí is coitianta a úsáidtear, a bhaineann leis an teaghlach avermectin. Tá na ceimiceáin chostasaí seo an-éifeachtach i gcoinne go leor speiceas néimeatóidí agus meastar go bhfuil siad sábháilte don chomhshaol9. Mar sin féin, meastar go gcruthóidh úsáid arís agus arís eile na néimeatóidí seo brú roghnúcháin a fhágfaidh go mbeidh néimeatóidí péine frithsheasmhacha mar thoradh air, beagnach cinnte, mar a léiríodh i gcás roinnt lotnaidí feithidí, amhail Leptinotarsa decemlineata, Plutella xylostella agus na néimeatóidí Trichostrongylus colubriformis agus Ostertagia circumcincta, a d'fhorbair friotaíocht de réir a chéile in aghaidh avermectins10,11,12. Dá bhrí sin, ní mór patrúin frithsheasmhachta a scrúdú go rialta agus scagadh leanúnach a dhéanamh ar néimeatóidí chun bearta malartacha, cost-éifeachtacha agus neamhdhíobhálacha don chomhshaol a aimsiú chun PVD a rialú. Le blianta beaga anuas, tá roinnt údar tar éis úsáid sleachta plandaí, blátholaí agus substaintí so-ghalaithe mar ghníomhairí rialaithe néimeatóidí a mholadh13,14,15,16.
Le déanaí, léiríomar gníomhaíocht nematicídeach indóil, móilín comharthaíochta idircheallach agus idirríochtúil, i Caenorhabditis elegans 17. Is comhartha intracellular forleathan é indól in éiceolaíocht mhiocróbach, ag rialú feidhmeanna iomadúla a mbíonn tionchar acu ar fhiseolaíocht mhiocróbach, foirmiú spór, cobhsaíocht phlasmaid, friotaíocht drugaí, foirmiú bithscannán, agus virúlacht 18, 19. Níl staidéar déanta ar ghníomhaíocht indóil agus a dhíorthaigh i gcoinne néimeatóidí pataigineacha eile. Sa staidéar seo, rinneamar imscrúdú ar ghníomhaíocht nematicídeach 34 indóil i gcoinne néimeatóidí péine agus shoiléiríomar meicníocht gníomhaíochta an 5-iaidíndóil is cumhachtaí ag baint úsáide as micreascópacht, grianghrafadóireacht am-imeachta, agus turgnaimh dugaireachta móilíneacha, agus rinneamar measúnú ar a éifeachtaí tocsaineacha ar phlandaí ag baint úsáide as measúnacht phéacadh síolta.
Tuairiscíodh roimhe seo go mbíonn éifeacht nematicídeach ag tiúchain arda (>1.0 mM) d'indól ar néimeatóidí17. Tar éis cóireála B. xylophilus (céimeanna saoil measctha) le indól nó 33 díorthach indóil éagsúil ag 1 mM, tomhaiseadh mortlaíocht B. xylophilus trí néimeatóidí beo agus marbha a chomhaireamh sna grúpaí rialaithe agus cóireáilte. Léirigh cúig indól gníomhaíocht nematicídeach shuntasach; ba é 95 ± 7% marthanacht an ghrúpa rialaithe neamhchóireáilte tar éis 24 uair an chloig. As na 34 indól a tástáladh, ba chúis le 5-iaidíndól agus 4-fluairíndól ag 1 mM mortlaíocht 100%, ach ba chúis le 5,6-défhluairíndól, meitilíndól-7-carbocsaileáit, agus 7-iaidíndól mortlaíocht thart ar 50% (Tábla 1).
Éifeacht 5-iaidíndóil ar fhoirmiú folús agus meitibileacht néimeatóide adhmaid ghiúise. (A) Éifeacht avermectin agus 5-iaidíndóil ar néimeatóidí fireann fásta, (B) uibheacha néimeatóide céim L1 agus (C) meitibileacht B. xylophilus, (i) níor breathnaíodh folús ag 0 h, mar thoradh ar an gcóireáil bhí (ii) folús, (iii) carnadh il-folús, (iv) at folús, (v) comhleá folús agus (vi) foirmiú folús ollmhór. Léiríonn saigheada dearga at folús, léiríonn saigheada gorma comhleá folús agus léiríonn saigheada dubha folús ollmhór. Barra scála = 50 μm.
Ina theannta sin, rinne an staidéar seo cur síos freisin ar an bpróiseas seicheamhach báis de bharr meatáin i néimeatóidí péine (Fíor 4C). Is cineál báis cille neamh-apoptóiseach é bás meatáinigineach a bhaineann le carnadh folúsail chíteaplasmacha suntasacha27. Is cosúil go bhfuil dlúthbhaint ag na lochtanna moirfeolaíocha a breathnaíodh i néimeatóidí péine le meicníocht an bháis de bharr meatáin. Léirigh scrúdú micreascópach ag amanna éagsúla gur cruthaíodh folúsail ollmhóra tar éis 20 uair an chloig de nochtadh do 5-iaidíndól (0.1 mM). Breathnaíodh folúsail mhicreascópacha tar éis 8 n-uaire an chloig de chóireáil, agus mhéadaigh a líon tar éis 12 uair an chloig. Breathnaíodh roinnt folúsail mhóra tar éis 14 uair an chloig. Bhí roinnt folúsail chomhleáite le feiceáil go soiléir tar éis 12–16 uair an chloig de chóireáil, rud a léiríonn gurb é comhleá folúsail bunús an mheicníocht báis meatáinigineach. Tar éis 20 uair an chloig, fuarthas roinnt folúsail ollmhóra ar fud na péiste. Is ionann na breathnuithe seo agus an chéad tuarascáil ar mheitióis i C. elegans.
I bpéisteanna ar tugadh 5-iaidíndóil dóibh, breathnaíodh comhiomlánú agus réabadh folúsól freisin (Fíor 5), mar is léir ó lúbadh na bpéisteanna agus scaoileadh folúsól isteach sa chomhshaol. Breathnaíodh briseadh folúsól freisin i scannán an bhlaosc uibhe, a choimeádtar slán de ghnáth ag L2 le linn gor (Fíor Fhorlíontach S2). Tacaíonn na breathnuithe seo le baint ag carnadh sreabhán agus teip osmo-rialála, chomh maith le díobháil cille inchúlaithe (RCI), i bpróiseas foirmithe agus suppuration folúsól (Fíor 5).
Agus ról iaidín i bhfoirmiú folúsail a breathnaíodh á hipitéisiú againn, rinneamar imscrúdú ar ghníomhaíocht nematicídeach iaidíd sóidiam (NaI) agus iaidíd photaisiam (KI). Mar sin féin, ag tiúchain (0.1, 0.5 nó 1 mM), ní raibh tionchar acu ar mharthanas néimeatóide ná ar fhoirmiú folúsail (Fíor Fhorlíontach S5), cé go raibh éifeacht nematicídeach bheag ag 1 mM KI. Ar an láimh eile, spreag 7-iaidíndól (1 nó 2 mM), cosúil le 5-iaidíndól, il-folúsail agus dífhoirmíochtaí struchtúracha (Fíor Fhorlíontach S6). Léirigh an dá iaidíndól tréithe feinitíopacha comhchosúla i néimeatóidí péine, ach níor léirigh NaI ná KI. Is suimiúil an rud é, níor spreag indól foirmiú folúsail i B. xylophilus ag na tiúchain a tástáladh (níor taispeánadh sonraí). Dá bhrí sin, dheimhnigh na torthaí gurb é an coimpléasc indóil-iaidín atá freagrach as folúsú agus meitibileacht B. xylophilus.
I measc na n-indól a tástáladh le haghaidh gníomhaíochta nematicide, bhí an t-innéacs sleamhnáin is airde ag 5-iaidíndól de -5.89 kcal/mol, agus ina dhiaidh sin 7-iaidíndól (-4.48 kcal/mol), 4-fluairíndól (-4.33), agus iaidíndól (-4.03) (Fíor 6). Cobhsaíonn an nascadh hidrigine láidir cnámh droma atá ag 5-iaidíndól le leucine 218 a cheangal, ach ceanglaíonn gach díorthach iaidíndóil eile le serine 260 trí naisc hidrigine slabhra taobh. I measc iaidíndóil eile a samhaltaíodh, tá luach ceangailteach de -5.248 kcal/mol ag 2-iaidíndól, atá mar gheall ar a phríomhnasc hidrigine le leucine 218. I measc na gceanglaíochtaí aitheanta eile tá 3-iaidíndól (-4.3 kcal/mol), 4-iaidíndól (-4.0 kcal/mol), agus 6-fluairíndól (-2.6 kcal/mol) (Fíor Forlíontach S8). Cruthaíonn formhór na n-indól halaiginithe agus an indól féin, seachas 5-iaidíndól agus 2-iaidíndól, nasc le seirín 260. Is léiriú é an fhíric go bhfuil nascadh hidrigine le leucine 218 ina chomhartha ar cheangal éifeachtúil gabhdóra-ligand, mar a breathnaíodh i gcás ivermectin (Fíor Fhorlíontach S7), agus deimhníonn sé sin go gceanglaíonn 5-iaidíndól agus 2-iaidíndól, cosúil le ivermectin, go docht le suíomh gníomhach an ghabhdóra GluCL trí leucine 218 (Fíor 6 agus Fíor Fhorlíontach S8). Molaimid go bhfuil an ceangal seo riachtanach chun struchtúr oscailte na bpoll sa choimpléasc GluCL a choinneáil agus, trí cheangal go docht le suíomh gníomhach an ghabhdóra GluCL, go gcoinníonn 5-iaidíndól, 2-iaidíndól, avermectin agus ivermectin an cainéal ian oscailte agus go gceadaíonn sé ionsú sreabhán.
Dugaireacht mhóilíneach indóil agus indóil halaiginithe le GluCL. Treoshuímh cheangailteach ligand (A) indóil, (B) 4-fluairindóil, (C) 7-iaidíndóil, agus (D) 5-iaidíndóil leis an suíomh gníomhach de GluCL. Léirítear an próitéin le ribín, agus taispeántar na naisc hidrigine cnámh droma mar línte poncaithe buí. Taispeánann (A′), (B′), (C′), agus (D′) idirghníomhaíochtaí na ligand comhfhreagrach leis na hiarmhair aimínaigéid máguaird, agus léirítear na naisc hidrigine slabhra taobh le saigheada poncaithe bándearga.
Rinneadh turgnaimh chun meastóireacht a dhéanamh ar an éifeacht thocsaineach a bhí ag 5-iaidíndól ar phéacadh síolta cabáiste agus raidise. Ní raibh mórán éifeachta, nó aon éifeacht ar chor ar bith, ag 5-iaidíndól (0.05 nó 0.1 mM) nó avermectin (10 μg/mL) ar phéacadh tosaigh agus ar theacht chun cinn na bplandaí (Fíor 7). Ina theannta sin, ní bhfuarthas aon difríocht shuntasach idir ráta péactha na rialuithe neamhchóireáilte agus na síolta a ndearnadh cóireáil orthu le 5-iaidíndól nó avermectin. Ní raibh aon éifeacht shuntasach ar fhadú fréimhe agus ar líon na bhfréamhacha cliathánacha a foirmíodh, cé gur chuir 1 mM (10 n-uaire a thiúchan gníomhach) de 5-iaidíndól moill bheag ar fhorbairt fréamhacha cliathánacha. Léiríonn na torthaí seo nach bhfuil 5-iaidíndól tocsaineach do chealla plandaí agus nach gcuireann sé isteach ar phróisis forbartha plandaí ag na tiúchain a ndearnadh staidéar orthu.
Éifeacht 5-iaidíndóil ar phéacadh síolta. Péacadh, fás agus fréamhú cliathánach síolta B. oleracea agus R. raphanistrum ar mheán agair Murashige agus Skoog le nó gan avermectin nó 5-iaidíndóil. Taifeadadh an péacadh tar éis 3 lá goradáin ag 22°C.
Tuairiscítear sa staidéar seo roinnt cásanna ina maraítear néimeatóidí ag indóil. Rud tábhachtach, is é seo an chéad tuarascáil ar mheitiléiniú a spreagann iaidíndól (próiseas de bharr carnadh folúsail bheaga a chumascann de réir a chéile ina folúsail ollmhóra, rud a fhágann go réabtar an scannán agus go mbásann sé sa deireadh) i snáthaidí péine, agus go bhfuil airíonna néimeaticídeacha suntasacha ag iaidíndól cosúil le hairíonna an néimeaticíde tráchtála avermectin.
Tuairiscíodh roimhe seo go mbíonn feidhmeanna comharthaíochta iomadúla ag indóil i bprócaróit agus in eocaróit, lena n-áirítear cosc/foirmiú bithfhilm, marthanacht baictéarach, agus pataigineacht19,32,33,34. Le déanaí, tá spéis mhór taighde tarraingthe ag éifeachtaí teiripeacha féideartha indóil halaiginithe, alcalóidigh indóil, agus díorthaigh leathshintéiseacha indóil35,36,37. Mar shampla, tá sé léirithe go maraíonn indóil halaiginithe cealla leanúnacha Escherichia coli agus Staphylococcus aureus37. Ina theannta sin, is díol spéise eolaíochta é éifeachtúlacht indóil halaiginithe i gcoinne speiceas, géineas agus ríocht eile a staidéar, agus is céim i dtreo an sprioc seo a bhaint amach an staidéar seo.
Anseo, molaimid meicníocht le haghaidh marfacht spreagtha ag 5-iaidíndól i C. elegans bunaithe ar ghortú cille inchúlaithe (RCI) agus meitiliú (Fíoracha 4C agus 5). Is comharthaí de RCI agus meitiliú iad athruithe éidéimeacha amhail at agus meath folúsach, a léirítear mar fholúis ollmhóra sa chíteaplasma48,49. Cuireann RCI isteach ar tháirgeadh fuinnimh trí tháirgeadh ATP a laghdú, rud a fhágann go dteipeann ar an gcaidéal ATPáise, nó go gcuireann sé isteach ar scannáin chealla agus go dtiocfaidh sreabhadh tapa Na+, Ca2+, agus uisce50,51,52 chun cinn. Eascraíonn folúis intreachíteaplasmacha i gcealla ainmhithe mar thoradh ar charnadh sreabhán sa chíteaplasma mar gheall ar shreabhadh isteach Ca2+ agus uisce53. Is suimiúil go bhfuil an mheicníocht seo damáiste cille inchúlaithe má tá an damáiste sealadach agus má thosaíonn na cealla ag táirgeadh ATP ar feadh tréimhse áirithe ama, ach má leanann an damáiste nó má théann sé in olcas, faigheann na cealla bás.54 Léiríonn ár mbreathnuithe nach bhfuil néimeatóidí a ndearnadh cóireáil orthu le 5-iaidíndól in ann bithshintéis gnáth a athbhunú tar éis nochtadh do dhálaí struis.
D’fhéadfadh an feinitíopa meitiliúcháin a spreag 5-iaidíndól i B. xylophilus a bheith mar gheall ar láithreacht iaidín agus a dháileadh móilíneach, ós rud é go raibh níos lú éifeacht choscach ag 7-iaidíndól ar B. xylophilus ná mar a bhí ag 5-iaidíndól (Tábla 1 agus Fíor Forlíontach S6). Tá na torthaí seo comhsheasmhach go páirteach le staidéir Maltese et al. (2014), a thuairiscigh gur chuir trasghluaiseacht an chuid nítrigine piridile in indól ón suíomh para- go dtí an suíomh meitea- deireadh le folúsú, cosc fáis, agus cíteatocsaineacht i gcealla U251, rud a thugann le fios go bhfuil idirghníomhaíocht an mhóilín le suíomh gníomhach ar leith sa phróitéin ríthábhachtach27,44,45. Tacaíonn na hidirghníomhaíochtaí idir indól nó indóil halaiginithe agus gabhdóirí GluCL a breathnaíodh sa staidéar seo leis an tuairim seo freisin, toisc gur aimsíodh go gceanglaíonn 5- agus 2-iaidíndól le gabhdóirí GluCL níos láidre ná na hindóil eile a scrúdaíodh (Fíor 6 agus Fíor Forlíontach S8). Fuarthas amach go gceanglaíonn an iaidín ag an dara nó an cúigiú suíomh den indól le leucine 218 den ghabhdóir GluCL trí naisc hidrigine cnámh droma, ach cruthaíonn indóil halaiginithe eile agus an indól féin naisc hidrigine slabhra taobh laga le serine 260 (Fíor 6). Dá bhrí sin, táimid ag tuairimíocht go bhfuil ról tábhachtach ag suíomh an halaigine i ndíghrádú folúiseach, ach go gcoinníonn ceangal daingean 5-iaidíndóil an cainéal ian ar oscailt, rud a cheadaíonn sreabhadh tapa sreabhán agus réabadh folúis. Mar sin féin, níl meicníocht mhionsonraithe gníomhaíochta 5-iaidíndóil cinnte fós.
Sula gcuirtear 5-iaidíndól i bhfeidhm go praiticiúil, ba cheart a éifeacht thocsaineach ar phlandaí a anailísiú. Léirigh ár dturgnaimh phéacadh síolta nach raibh aon éifeacht dhiúltach ag 5-iaidíndól ar phéacadh síolta ná ar phróisis forbartha ina dhiaidh sin ag na tiúchain a ndearnadh staidéar orthu (Fíor 7). Dá bhrí sin, soláthraíonn an staidéar seo bunús d'úsáid 5-iaidíndól sa timpeallacht éiceolaíoch chun dochar néimeatóidí péine do chrainn ghiúise a rialú.
Léirigh tuarascálacha roimhe seo gur cur chuige féideartha é teiripe atá bunaithe ar indól chun aghaidh a thabhairt ar fhadhb na frithsheasmhachta in aghaidh antaibheathach agus dul chun cinn ailse55. Ina theannta sin, tá gníomhaíochtaí antibacterial, frithailse, frithocsaídeacha, frith-athlastacha, frithdiaibéiteacha, frithvíreasacha, frithiomadúla agus frith-eitinn ag indóil agus d'fhéadfadh siad a bheith ina mbonn gealladh fúthu le haghaidh forbairt drugaí56,57. Tugann an staidéar seo le fios den chéad uair go bhféadfaí iaidín a úsáid mar ghníomhaire frithsheadánach agus anthelmintic.
Aimsíodh avermectin tríocha bliain ó shin agus bhuaigh sé Duais Nobel in 2015, agus tá a úsáid mar anthelmintic fós ar siúl go gníomhach. Mar sin féin, mar gheall ar fhorbairt thapa friotaíochta in aghaidh avermectiní i néimeatóidí agus lotnaidí feithidí, tá gá le straitéis mhalartach, ar chostas íseal, agus atá neamhdhíobhálach don chomhshaol chun ionfhabhtú péine (PWN) i gcrainn ghiúise a rialú. Tuairiscítear sa staidéar seo freisin an mheicníocht trína maraíonn 5-iaidíndol néimeatóidí péine agus go bhfuil tocsaineacht íseal ag 5-iaidíndol do chealla plandaí, rud a osclaíonn dea-ionchais dá fheidhmchlár tráchtála amach anseo.
D'fhormheas Coiste Eitice Ollscoil Yeungnam, Gyeongsan, an Chóiré, na turgnaimh uile, agus rinneadh na modhanna de réir threoirlínte Choiste Eitice Ollscoil Yeungnam.
Rinneadh turgnaimh gorlainne uibheacha ag baint úsáide as nósanna imeachta seanbhunaithe43. Chun rátaí gorlainne (HR) a mheas, aistríodh néimeatóidí fásta 1 lá d'aois (thart ar 100 baineannach agus 100 fireannach) chuig miasa Petri ina raibh an fungas agus ligeadh dóibh fás ar feadh 24 uair an chloig. Ansin, leithlisíodh na huibheacha agus rinneadh iad a chóireáil le 5-iaidíndól (0.05 mM agus 0.1 mM) nó avermectin (10 μg/ml) mar fhionraí in uisce driogtha steiriúil. Aistríodh na fionraí seo (500 μl; thart ar 100 ubh) chuig toibreacha pláta cultúir fíocháin 24-tholl agus goradh iad ag 22 °C. Rinneadh comhaireamh L2 tar éis 24 uair an chloig de ghorlann ach measadh gur marbh iad mura mbogfadh na cealla nuair a spreagadh iad le sreang platanam mín. Rinneadh an turgnamh seo i ndá chéim, gach ceann acu le sé athrá. Comhcheanglaíodh agus cuireadh i láthair na sonraí ó na turgnaimh araon. Ríomhtar céatadán HR mar seo a leanas:
Rinneadh measúnú ar bhásmhaireacht larbhaí ag baint úsáide as nósanna imeachta a forbraíodh roimhe seo. Bailíodh uibheacha néimeatóidí agus rinneadh suthanna a shioncrónú trí ghoradh in uisce driogtha steiriúil chun larbhaí céim L2 a ghiniúint. Rinneadh larbhaí sioncrónaithe (thart ar 500 néimeatóid) a chóireáil le 5-iaidíndól (0.05 mM agus 0.1 mM) nó avermectin (10 μg/ml) agus tógadh iad ar phlátaí B. cinerea Petri. Tar éis 48 uair an chloig goradáin ag 22 °C, bailíodh néimeatóidí in uisce driogtha steiriúil agus scrúdaíodh iad le haghaidh láithreacht céimeanna L2, L3, agus L4. Léirigh láithreacht céimeanna L3 agus L4 claochlú larbhaí, ach léirigh láithreacht chéim L2 gan aon chlaochlú. Fuarthas íomhánna ag baint úsáide as an gCóras Íomháithe Cealla Digiteach iRiS™. Rinneadh an turgnamh seo i dhá chéim, gach ceann acu le sé athrá. Comhcheanglaíodh agus cuireadh i láthair na sonraí ó na turgnaimh araon.
Rinneadh measúnú ar thocsaineacht 5-iaidíndóil agus avermectin do shíolta trí úsáid a bhaint as tástálacha péactha ar phlátaí agair Murashige agus Skoog.62 Rinneadh síolta B. oleracea agus R. raphanistrum a sáithiú ar dtús in uisce driogtha steiriúil ar feadh lae amháin, nite le 1 ml eatánól 100% iad, steiriliú le 1 ml bleach tráchtála 50% (3% hipeaclóirít sóidiam) ar feadh 15 nóiméad, agus nite cúig huaire le 1 ml uisce steiriúil iad. Ansin brúdh na síolta steiriliú ar phlátaí agair péactha ina raibh 0.86 g/l (0.2X) meán Murashige agus Skoog agus 0.7% agar baictéareolaíoch le nó gan 5-iaidíndóil nó avermectin. Ansin goradh na plátaí ag 22 °C, agus tógadh íomhánna tar éis 3 lá goradáin. Rinneadh an turgnamh seo i ndá chéim, agus bhí sé athrá i ngach ceann acu.
Am an phoist: 26 Feabhra 2025